http://hdl.handle.net/10195/3844 2013-05-24T23:05:47Z http://hdl.handle.net/10195/49148 Title: Charakterizácia oligosacharidov a krátkych polysacharidov vzniknutých štiepením kyseliny hyalurónovej metódami kvapalinovej chromatografie a štúdium kinetiky štiepenia kyseliny hyalurónovej Authors: Bezáková, Zuzana Abstract: Hlavným cieľom tejto práce bolo nájsť priemyselne využiteľný spôsob štiepenia hyaluronátu sodného s molekulovou hmotnosťou 1,3 ? 1,8 MDa na hyaluronát sodný s nízkou molekulovou hmotnosťou (0,3 MDa a menej) až oligosacharidy. Boli získané rozsiahle dáta popisujúce alternatívne spôsoby štiepenia HA o rôznej molekulovej hmotnosti. Na experimenty realizované v laboratórnych podmienkach bola vybratá metóda kyslej hydrolýzy, pričom boli obmieňané podmienky štiepenia reťazca hyaluronanu. Ako najzaujímavejšie sa javili metódy štiepenia využitím mikrovĺn a pomocou klasického ohrevu na varnom hniezde. Pre štiepenie hyaluronátu sodného kyslou hydrolýzou využitím mikrovlnného žiarenia pri pH 3 a teplote 105 °C bola stanovená rýchlostná konštanta 5 × 10-6 s-1. Štruktúra štiepeného hyaluronanu bola analyzovaná použitím FT-IR, HPLC a NMR alebo UV-VIS spektroskopiou. Boli pripravené technologické podklady pre priemyselnú výrobu nízkomolekulárnej kyseliny hyalurónovej. Bol navrhnutý postup výroby a overoval sa v poloprevádzke. Na základe nedostatkov, ktoré počas výroby vznikli, bol upravovaný a optimalizovaný. Na základe získaných výsledkov bol spracovaný návrh výrobného reglementu, ktorý poslúžil ako podklad pre zavedenie výroby nízkomolekulárnej a oligomérnej HA. 2012-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10195/49143 Title: Příprava nových esterů glykosidů Authors: Marques Dinis Pinto, Tiago Alexandre Abstract: Úkolem této práce byla příprava esterů monosacharidů. Předložená práce obsahuje dvě části, kde každá část obsahuje estery připravené z rozdílných glykosidů. V první části práce byl připraven set esterů na primární hydroxylové skupině D-glukosy (posice 6). Publikovanou metodou byla připravena výchozí komponenta, vycházejíce z .-methyl-D-glukosidu. V druhé části této práce byly připraveny 1,4-disubstituované 1,2,3-triazol- glykosidy a to 1,3-dipolární azid-alkyn cykloadicí (click reakce) jako alkoholová komponenta pro přípravu esterů. Jako karboxylové kyseliny byla použita kyselina benzoová, jakož její deriváty, zahrnujíce rovněž analoga salicylové kyseliny, která obsahovala brom jakožto reaktivní centrum pro další chemické modifikace. Jako kyseliny pro přípravu esterů byly rovněž použity aryl deriváty kyseliny octové, Z-glycin, L-fenylalanin; palmitová kyselina a jeden sulfonamid. 2013-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10195/49130 Title: Vliv extracelulární matrix na expresi genů v jaterních myofibroblastických buňkách Authors: Houser, David Abstract: Charakteristickým rysem fibrotických jater je hromadění vazivové tkáně, která je syntetizována myofibroblastickými buňkami, a to jednak portálními myofibroblasty, jednak aktivovanými hvězdicovými buňkami. Budu studovat chování těchto buněk kultivovaných v trojrozměrném gelu, který napodobuje poměry ve tkáni, a srovnávat je s chováním buněk kultivovaných za běžných podmínek na plastových miskách. 2012-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10195/49083 Title: HPLC/MS charakterizace regioizomerních směsí triacylglycerolů Authors: Dvořáková, Hana Abstract: Disertační práce se zabývá analýzou komplexních směsí triacylglycerolů, které představují významnou součást naší potravy a mají důležitou roli při mnoha biologických procesech v lidském organizmu. Předkládaný text shrnuje výsledky dosažené při separacích a následných identifikacích triacylglycerolů a jejich regioizomerů obsažených v rostlinných olejích, živočišných tucích a randomizačních směsích. Získané výsledky byly uvedeny ve čtyřech publikacích uveřejněných v mezinárodních odborných časopisech. Jednotlivé triacylglyceroly se mezi sebou mohou lišit v mnoha parametrech. Kombinací triacylglycerolů se v přírodě vytvářejí složité směsi, které není možné bez jejich předchozí důkladné separace identifikovat. Za účelem získání maximálního počtu separovaných triacylglycerolů byly optimalizovány chromatografické podmínky v systému argentační chromatografie. Bylo zjištěno, že složení mobilní fáze a délka chromatografické kolony měly významný vliv na účinnost separace triacylglycerolů a především jejich regioizomerů. V optimalizovaném systému byly analyzovány vzorky rostlinných olejů, živočišných tuků a randomizačních směsí, pro které bylo následně popsáno retenční chování příslušných triacylglycerolů včetně jejich regioizomerů. Dále bylo popsáno retenční chování cis-/trans- izomerů a triacylglycerolů obsahujících neobvyklé mastné kyseliny. Pomocí off-line dvourozměrné chromatografie byly studovány možnosti separace komplexních přírodních směsí triacylglycerolů. Sběr frakcí byl realizován v nevodném systému s obrácenými fázemi a jejich následná separace byla provedena v systému argentační chromatografie. Ortogonalita obou separačních systémů byla testována pro přírodní vzorky triacylglycerolů a jejich regioizomerů, které obsahovaly mastné kyseliny s rozdílnou délkou acylového řetězce, počtem, polohou a geometrií dvojných vazeb a různou regiozomerickou polohou mastných kyselin na skeletu glycerolu. Off-line dvourozměrná chromatografie obou komplementárních módů přinesla lepší chromatografickou selektivitu, která vedla k vyššímu počtu identifikovaných triacylglycerolů. Optimalizace podmínek randomizační reakce umožnila připravit ze zvolených standardů jednoduchých triacylglycerolů příslušné regioizomery. Randomizační reakci bylo možné použít pro jakýkoli počet a druh jednoduchých standardů triacylglycerolů. Tato reakce byla ověřena na reálných vzorcích rostlinných olejů a dále byla používána k přípravě různých syntetických směsí regioizomerů. Jednotlivé triacylglyceroly, které byly separovány při analýzách, byly identifikovány hmotnostním spektrometrem s chemickou ionizací za atmosférického tlaku (APCI-MS). Pro identifikované triacylglyceroly byly popsány významné fragmentové ionty pozorované v APCI hmotnostních spektrech a byla určena převládající mastná kyselina v poloze sn-2. Pomocí popsaných fragmentových iontů bylo uskutečněno srovnání pěti různých hmotnostních spektrometrů. Bylo zjištěno, že vliv odlišných typů hmotnostních analyzátorů byl nižší ve srovnání s efektem počtu dvojných vazeb, jejich polohy na acylovém řetězci a regiospecifické distribuci acylových řetězců na skeletu glycerolu. 2012-01-01T00:00:00Z